Xây dựng và thẩm định phương pháp định lượng Epicatechin trong viên nang cứng chứa cao khô hạt vải bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao

Tóm tắt

Mục tiêu: Xây dựng và thẩm định phương pháp định lượng epicatechin trong viên nang cứng chứa cao khô hạt vải bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC).

Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Đối tượng nghiên cứu là viên nang cứng chứa cao khô hạt vải. Phương pháp HPLC ghép nối detector UV được sử dụng để định lượng epicatechin. Điều kiện sắc ký gồm cột C18 (250 × 4,6 mm; 5 µm), pha động acetonitrile và dung dịch acid phosphoric 0,085% theo chương trình gradient, tốc độ dòng 1,0 ml/phút, thể tích tiêm mẫu 10 µL, bước sóng phát hiện 202 nm. Phương pháp được thẩm định theo các tiêu chí: độ chọn lọc, độ thích hợp hệ thống, độ chính xác, khoảng tuyến tính và độ đúng.

Kết quả: Phương pháp HPLC-UV cho thấy tính đặc hiệu tốt, pic epicatechin trong mẫu thử có thời gian lưu khoảng 12 phút và không bị nhiễu bởi các thành phần khác trong nền mẫu. Khoảng tuyến tính của phương pháp nằm trong khoảng nồng độ từ 1,5–30 µg/ml với hệ số tương quan R²= 0,9999. Độ thích hợp hệ thống và độ chính xác đều đạt yêu cầu với RSD < 2%. LOD = 0,5 µg/mL, LOQ = 1,5 µg/ml. Độ đúng được đánh giá bằng phương pháp thêm chuẩn ở ba mức nồng độ 50%, 100% và 150%, cho tỷ lệ thu hồi nằm trong khoảng chấp nhận được.

Kết luận: Phương pháp HPLC-UV đã được xây dựng và thẩm định để định lượng epicatechin trong viên nang cứng chứa cao khô hạt vải. Phương pháp có độ tin cậy cao và có thể áp dụng trong kiểm nghiệm và kiểm soát chất lượng các chế phẩm chứa cao khô hạt vải.